模板纯度,有较多蛋白或其他杂质时,会一定程度影响PCR效率；模板量,过高的模板量反而会降低pcr效率和特异性；引物,引物的长度需要再效率和特异性间获得优化,其次要控制引物GC含量；聚合酶,要考虑酶的保真率和速度；Mg...