简述化学降解法测序的基本原理以及主要应用范围
人气:272 ℃ 时间:2020-09-12 08:32:39
解答
这一方法的基本步骤为:
(1)先将DNA的末端之一进行标记,通常为放射性同位素32P;
(2)在多组互相独立的化学反应中分别进行特定碱基的化学修饰;
(3)在修饰碱基位置化学法断开DNA链;
(4)凝胶电泳将DNA链按长短分开;
(5)根据放射自显影显示区带,直接读出DNA的核苷酸序列
化学降解较之链终止法具有明显优点:所测序列来自原DNA分子而不是酶促合成所产生的拷贝
现在第二代带三代测序都出来了,还用化学降解法,是不是很老套?
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