根据DNA半保留复制的特点，DNA双链被³H标记，在不含³H标记的培养液中完成第一次分裂后，每条染色体的DNA中一条链有³H标记，另一条链没有标记．在不含³H标记的培养液中进行第二次分裂，后期一半染色体被标记，一半染色体没有被标记．又有丝分裂后期，着丝点分裂，染色体数目加倍，细胞中共含有20条染色体．因此，在形成第2代细胞时的有丝分裂后期，没有被标记的染色体数为10条．
故选：D．