你两次实验的PCR模板是否同一个样本?如果是同一个样本,那就说明你的PCR试剂或者引物有问题,更换如果不是同一个样本,就再做一次实验把曾经扩增出目的片段的那个DNA或cDNA样本,现在扩增片段小于目的片段的样本,两个样...