MSP需要特殊要求：1.甲基化引物、非甲基化引物.Tm差异不能太大 2.甲基化引物和非甲基化引物带有至少一个CpG序列,越多甲基化位点越好.至少有一个CpG序列在引物3‘端.最好设计一对野生型引物来验证摸板.