把这段基因输入设计软件里,调节引物位置,使变性温度在94度,退火温度=Tm-（5到10度） 延伸温度72度左右,满足这些条件基本就可以了,当然还要根据实际情况多次实验得到最佳引物.如果你要扩增整个的基因,引物必须要在起始密码子之前,或包含起始密码子.最后加上酶切位点就可以了.