1,提取蛋白的时候要充分超声粉碎,然后高速离心.吸取上清的时候不要触到沉淀.污染不一定是RNA和DNA,还有可能是胶里面有杂质.
2.遇热膨胀过度,你可以在电泳槽里面安放冰槽,电泳液预先降温,同时降低电泳时的电流.还有配琼脂也要用缓冲液,而不是水,不然不导电.接触不好也会引起条带变形我要的蛋白分子量大概是40K-130K的，那应该用多少g离心比较好呢？我是在120V下面跑了2个小时，4度的环境，没有单独设置电流，那应该用多大的电流比较好？琼脂是买的Bio-Rad的商品琼脂，好像也没办法单独加缓冲液。刚刚你这么一说，我突然想到我的琼脂是热到73度左右就直接加在胶上面了，是不是这个温度不合适？那应该用什么温度啊？多谢了！一般离心12000 x g，10分钟120v 2小时，肯定要升温的。可以多试几个，降低电压，延长时间。琼脂买回来是粉吧，配置的时候要加缓冲液，而不是水来加热融化。如果买的是冻结的琼脂，要保证充分加热溶解，知道没有肉眼可见的颗粒才行。加热的温度不用担心，反正要等冷了才跑的