DNA连接酶只能修补DNA双链中有一个小缺口的单链,也就是说,这个缺口的对面,DNA是完整的,不是断裂的.如果两条链在同一个地方断裂就是2条DNA了,这时连接酶没作用,当然,如果DNA上有不止一个小缺口,只要DNA双链还完整,DNA连接酶就可以进行修补.DNA聚合酶在DNA复制中期延长作用,根据另一条链按碱基互补不断延长DNA,而DNA复制中所出现的引物水解后留下的缺口,就由DNA连接酶来修补.RNA聚合酶和DNA聚合酶差不多,就是连接核糖核苷酸形成磷酸二酯键.在DNA复制中(合成引物)和转录中起作用.