退火温度,可作为PCR退火温度的参考值,PCR引物如果由上海生化生工合成,建议Tm-5℃,如果由英俊合成,直接用Tm；PCR如果没有条带,建议降低退火温度（以2℃为间隔）,如果条带过多或有杂带,建议升高退火温度,通常PCR使用两条引物中最小的Tm作为参考,盐浓度无需计较,暂且认为相同.