可以使用primer5 或者primerdesign设计 还是主要考虑发夹结构,GC含量,Tm值和引物交叉,还有减少引物二聚体的产生.
如果是扩增启动子的话,建议选择引物的长度30-35bp,一般试剂盒里有接头引物的,只要在下游已知序列设计引物就可以咯