你的目的片段没有起始密码子,显然要利用pET-28a的ATG密码子,因此表达的外源蛋白将融合进一段pET-28a序列所编码的肽段,这段肽段为36肽：MetGlySerSerHisHisHisHisHisHisSerSerGlyLeuValProArgGlySerHisMetAlaSerMetThrGlyGlyGlnGlnMetGlyArgGlySer（GluPhe）【其中括号内两个氨基酸为EcoRI识别序列所编码】,表达蛋白的其它氨基酸残基则由你的外源片段上EcoRI识别位点后至终止密码子之间的碱基所编码,这样你表达的外源蛋白的一级序列就出来了,那么算分子量就是全部氨基酸残基的分子量之和了.