从细胞中提取蛋白质的问题.
用 含GSTtag 的DNA去tansfect 细胞,然后用 West blot 检查蛋白表达 然后用 GST pulldown 去获得 表达的蛋白和与之反应的蛋白,跑胶),然后把band 切下来,用质谱仪检查.我看程序中并没有加 脱氧核糖核酸酶 去除杂质的步骤,只是用很高的速度去 spin cell lysate,然后取上清液.这样可以吗?脱氧核糖核酸等杂质会不会对结果产生影响啊?还是说它们根本进不到胶里面?
人气:448 ℃ 时间:2020-06-02 01:23:53
解答
带GST tag的蛋白体外分离纯化时,GST pulldown过程中,只有带GST的融合蛋白可以特异结合到柱子上,核酸等杂质都随流出液流走了,不会干扰你的实验结果.
推荐
猜你喜欢
- 细胞是生物体结构和功能的基本单位.A~D为四个细胞模式图,对下图有关叙述正确的是( ) A.A、B的细胞结构复杂,而C、D的细胞结构相对简单 B.不遵循孟德尔遗传定律的基因只存在于C
- 在等差数列{an}中,a3+a8+a10=9,那么S13=_.
- three drinks
- 求1/2+(1/2)²+(1/2)³+(1/2)的4次方+...+(1/2)的n次方
- 财务管理计算题,L公司原有资产2000万元 ,权益乘数为2,普通股每股面值10元,
- I have bought two ballpens,_______ writes well.
- 酸碱中和滴定判断误差:用量筒测好待测液体积后,用蒸馏水清洗量筒,把洗液一并倒入锥形瓶,为什么会偏高
- 如果线段AB=8cm,BC=6cm,且两线段在同一条直线上,求线段AC的中点与点B的距离.