关于DNA外切酶具有核酸外切酶活性的相关概念
1.“DNA聚合酶I具有3’——5’方向核酸外切酶的活性”不就是说DNA聚合酶I可以沿着单链DNA从3’-OH到5’-磷酸方向移动吗?
2.那么它在移动的过程中“从DNA的3’-OH末端降解DNA分子,每次水解释放一个核苷酸”(1)是不是说在DNA聚合酶I移动的过程中逐个水解核苷酸,使核苷酸逐个从DNA链上脱落呢?(2)“从DNA的3’-OH末端降解DNA分子”是什么意思呢?是不是指被水解掉的核苷酸从DNA单链上脱落时的部位是这个核苷酸的3’-OH呢?如果这样的话不就和猜想1相反了吗?如果按照1的猜想应该是这个核苷酸的5’-磷酸被DNA聚合酶I水解.
唉,迷惘!(请不要COPY很多东西过来,讲得通俗点好吗?
人气:460 ℃ 时间:2020-02-20 15:10:30
解答
DNA聚合酶具有两种活性,一个是聚合酶活性,5’——3’,意思是说在合成的单链或者引物链的3’加上与模板链互补的脱氧核苷酸
此外,DNA聚合酶还有一个外切酶活性位点,用来校正剪切掉错误的脱氧核苷酸.这个活性是3’——5’方向,所以可以将新链3’端的错误配对脱氧核苷酸去掉.
两个位点对于DNA的结合能力是不同的,正常情况(即配对正确)下,聚合酶位点的结合能力强,而外切酶位点结合能力弱,因此DNA聚合酶从5’向3’合成双链DNA;当合成时出现错配的情况,聚合酶位点与错配链的结合能力下降约100倍,而外切酶的结合能力不变,强于此时的聚合酶位点,所以DNA3’端移向外切酶位点,并剪切掉错误的配对;当错误配对被切掉后,相当于重新回到了正确配对的情况,故而聚合酶位点结合能力再次强于外切酶位点,DNA回到聚合酶位点,继续合成新链.
这是由我们分子生物学的课程中学来的,我们使用的教材是《molecular biology of genes》,由发现DNA双螺旋的Waston主编
如果你还是不懂,可以将邮箱发给我,我可以将我们上课的课件发给你
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