构建载体就是把目标DNA、载体、DNA连接酶、酶的buffer放到一起,然后4度连接过夜就行了.上面各个东西的用量,你可以参考连接酶的说明书.如果你是想连T载体的话,就可以直接拿PCR产物和载体连,如果是想做表达载体的话,你还要把目标DNA和载体进行酶切回收后,才能连.
质粒提取的方法一般用碱提法,去网上搜下,有很多的.或者买试剂盒提（试剂盒大部分也是碱提法的）.