培养基是否无菌,培养基的无菌处理措施是否恰当（有些营养物质不能进高温灭菌,会导致物质被破坏,应采用其他方式,如除菌过滤）,培养基是否调到合适pH值,培养过程中是否有需补加的营养物,如有也需考虑无菌、无菌处理方法和pH等问题