紫外分光光度法的原理：许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱,因此可用紫外分光光度法对有机物质进行定性鉴定,结构分析及定量测定．紫外分光光度法定量测定的依据是比耳定律.首先确定化合物的紫外吸收光谱,确定最大吸收波长.在选定的波长下,作出化合物溶液的工作曲线,根据在相同条件下测得待测液的吸光度值来确定待测液中化合物的含量.
在测量之前是要确定最佳吸收波长的,不同的化合物有不同的吸收光谱.所以选择540nm是跟你要测量的物质有关的,而不是规定每个物质都必须在该波长下测量.