质粒是一个闭合的DNA圆圈,你得先切开它,把它切成一条线；然后你再从一长串DNA上切下你要的目的片段,用连接酶像胶水一样,吧质粒的两端和目的片段的两端连接起来——又成一个圆圈了,但是这次这个DNA圆圈已经含有你要的片段了.
由于载体质粒只有圆圈状才有活性,才有用,所以你必须这么做.