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real time PCR看家基因的选择重要吗
人气:498 ℃ 时间:2020-03-23 21:06:58
解答
非常重要,因为根据原理,RT-PCR是假设看家基因的表达恒定从而得出目标基因的相对含量
所以,必须要确保看家基因本身不会受到实验条件的影响,即看家基因在对照组与实验组具有相同的表达量
请仔细阅读原始文献
Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method很多实验室都默认使用actin或者18s ?这俩可靠吗一个细胞骨架,一个核糖体结构,理论上都是细胞必须且稳定表达的,是广泛使用的看家基因。无论用哪种,最好还是要跑一下是否不受实验处理的影响,不要直接使用
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