A、叶绿体本身有颜色，不需染色，用蒸馏水制片就可以了，A正确；
B、探究CO2浓度对光合速率的影响，至少要设置3个组：无CO2的、低浓度的、高浓度的．只用1%的NaHCO3作缓冲剂，不能满足梯度实验的要求，B错误；
C、30%蔗糖溶液可使植物细胞发生质壁分离，用清水处理观察质壁分离复原，C正确；
D、提取叶绿体色素要用到无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅，无水乙醇用于叶绿素色素的提取，碳酸钙防止色素被破坏，二氧化硅使滤液研磨充分，利于色素释放，D正确．
故选：B．
| 选项 | 实验目的 | 所用试剂 |
| A | 观察叶绿体 | 蒸馏水 |
| B | 探究CO2浓度对光合速率的影响 | 1%的NaHCO3溶液 |
| C | 观察质壁分离及复原 | 30%蔗糖溶液、清水 |
| D | 提取叶绿体色素 | 无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅 |