不排除是预染Marker质量又问题marker没有问题，实验室其他人做实验就没有问题。因为我是独立出来的，所以实验过程和仪器与他们不是很相同那建议你在适当延长一下转膜的时间吧，三、四个小时都可以的。用抗体检测过之后，150kd的蛋白都转过去了，各种大小的蛋白都有转过去。也正常，marker应该不会需要太长时间。我转膜时上下的滤纸有接触，会影响marker的转膜吗？滤纸接触不会有任何影响，既然大分子蛋白转过去了，说明一定是你的预染Marker是有问题的，一般预染Marker上样之前也要用水煮一下的，再用就是是不是你的用量少了呢？用量不少，不过marker没有煮过，预染的应该不用煮吧也许这是问题所在吧嗯，多加一些，至少也得6uL，我们用的时候都煮一下的。