革兰氏染色法一般包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇脱色、沙黄（番红）复染等四个步骤,具体操作方法是：
1）涂片固定.
2）草酸铵结晶紫染1分钟.
3）自来水冲洗.
4）加碘液覆盖涂面染约1分钟.
5）水洗,用吸水纸吸去水分.
6）加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.
7）蕃红梁色液（稀）染2分钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
染色结果
革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色.