不要试图找克隆序列的引物序列,找到克隆载体的连接位点前后去掉就可以了,中间就是你插入的序列,或者直接用DNAstar选择哪个载体直接去掉载体污染也行!DNAstar可以直接办到吗？你可以找到你用的载体的使用说明或者在网上找下该质粒的图谱，找到连接位点处的序列，上游一条和下游的相反的序列，5-6个碱基左右吧，然后查找，找到后看下前面的和后面的是不是跟载体序列一样，一样的话切除，中间的就是你连接的片段。DNAstar的 seqMan以及以前提交序列的sequin都可以办到的，但是最好是大量的序列的时候用好，几个序列自己手动就可以了。