个人认为在sanger法测序的时候
一是因为随着双脱氧核糖核酸的掺入,链延伸立即中止,所以延伸出长链的概率随链的增长而降低.
二是因为目前普遍使用的毛细管电泳（或者之前使用的测序胶）,分辨率也随链的增长而降低.可以简单的想象普通琼脂糖凝胶电泳,分辨100bp和150bp很容易,分辨1000bp和1050bp就比较困难,10000bp和10050bp非常困难.