1 曲线的趋势是什么 如果没有任何章法,说明试验不成功
2 模板有没有问题
3 逆转录
4 怀疑是荧光探针的问题你可以跑一下电泳看看恩，今天跑了电泳，没有扩增成功，明天想换整套试剂从新做一遍。曲线在前三次试的时候是毫无章法的，但是到第四次的时候呈现出一定的上扬趋势，但是荧光信号出现的比平常晚了六七个循环。模板应该没有问题的，不是逆转录，是直接拿来的质粒进行扩增的。