因为利用双缩脲试剂检验蛋白质要利用双缩脲反应——蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用形成紫蓝色络合物的呈色反应.
检测蛋白酶活性的指标是原来存在底物蛋白质,反应后底物被水解,证明蛋白酶有活性.但是如果用双缩脲试剂的话,就会和蛋白酶（本质也是蛋白质,而且酶的量不会随反应而减少）反应,所以就无法测定反应物是否被水解.