利用碘乙酸对糖酵解过程中3-磷酸甘油醛脱氢酶的抑制作用,使3-磷激甘油醛不再向前变化而积累.硫酸肼作为稳定剂,用来保护3-磷酸甘油醛使不自发分解.然后用2,4-二硝基苯肼与3-磷酸甘油醛在碱怀条件下形成2,4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物,其棕色程度与3-磷酸甘油醛含量成正比.