∵x+

1

x

=6，
∴（x-

1

x

）²=（x+

1

x

）²-4=36-4=32，
∴x-

1

x

=±4

2

，
又∵0＜x＜1，
∴x-

1

x

=-4

2

．
故答案为-4

2

．