美蓝浓度高和染色时间过长都会增加酵母菌的死亡,美兰有氧化性,浓度太高会使活菌很快致死,浓度低老龄细胞与活细胞不易区分；染色时间短,活细胞还没从蓝变无色,观察到的活细胞数量会比预计的少,染色时间长,活细胞数量也会减少.