1、将培养液转入离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下3000g离心10分钟.
2、 弃去上清,用预冷的0.05mol/L的CaCl2 溶液10ml轻轻悬浮细胞,冰上放置15-30分钟后,4℃下3000g离心10分钟.
3、弃去上清,加入4ml预冷含15%甘油的0.05mol/L的CaCl2 溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置几分钟,即成感受态细胞悬液.
4、 感受态细胞分装成200μl的小份,贮存于-70℃可保存半年.