用包被缓冲液稀释抗原或者抗体（可以稀释成不同的浓度,如1:100,1：1000,1：10000),100ul/孔,4度过夜就行了.第二天洗一下板子,然后封闭,就可以了.
第一次做的话,建议摸一下条件,可以做成倍比稀释.