A、只有活细胞才能发生质壁分离，A正确；
B、探究原生质层组成需要显微技术，B错误；
C、细胞壁的伸缩性远小于原生质层的伸缩性是质壁分离的原因，C正确；
D、由于发生了质壁分离证明了细胞失水与吸水，从而证明了发生渗透作用，D正确．
故选：B．