引物设计的原则和试验目的是相关的.如果是为了检测某一个片段有没有,那么只要考虑特异性和片段好不好扩就行了.一般片段大小控制在500bp左右,上下游引物在57-57度退火温度,引物互补情况不严重,不如不超过5个,单引物...