PCR克隆中GC含量高如何扩出?
人气:145 ℃ 时间:2020-07-05 07:24:39
解答
1)一般的公司有提供专门扩增高GC序列的酶和buffer提供,可以考虑,我们用宝生物的LA酶和GCbuffer
2)可以将序列扩增长一些,避免引物GC含量过高的区域,2步克隆
3)反应中加入DMSO等改进方法也是可行的,但对GC>75%的可能没有效果的
4)序列不长的话,可以考虑人工合成
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