PCR扩增gc含量很高的序列我要克隆一个gc含量很高（75％）的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc_数学解答

PCR扩增gc含量很高的序列
我要克隆一个gc含量很高（75％）的基因,然后在真核细胞表达,因为想要整个orf,但是终止子附近的gc 含量很高（大于80％）,但还要把终止子突变掉,所以引物还必须在终止子上.
请问对于设计引物和pcr扩增有什么好的建议.

人气：408 ℃　时间：2020-07-01 23:36:24

解答

没事,照常扩吧
gc buffer ,然后可以引物退火温度高一些,60以上.采用2步法试试