分离定律的实质是减数分裂时等位基因随同源染色体的分开而分离，产生不同配子的比例为1：1．杂种F₁与隐性类型测交，后代出现两种基因型和表现型的个体，证明杂种F₁产生了两种配子，即等位基因彼此分离．
故选：D．