第一步,将目的基因在大肠杆菌中表达出蛋白质；
第二步,将表达出的蛋白质注射动物进行免疫,产生相应的抗体,并提取出抗体（一抗）；
第三步,从转基因生物中提取蛋白质,走凝胶电泳；
第四步,将凝胶中的蛋白转移到硝酸纤维素膜上；
第五步,将抗体（一抗）与硝酸纤维素膜上的蛋白杂交,这时抗体（一抗）与目的基因表达的蛋白（抗原）会特异结合.
由于这种抗原—抗体的结合显示不出条带,所以加入一种称为二抗的抗体,它可以与一抗结合,二抗抗体上带有特殊的标记.如果目的基因表达出了蛋白质,则结果为阳性