取少量的土壤在培养基上培养,经过多次分离后得到一些细菌,再接种在另外的培养基上（这个培养基中加碳源、水、无机盐、不含氮的有机物）在无氧的条件下培养.最后经过多次分离,多次培养,就可以分离得到厌氧固氮菌.