显微镜的分辨力的大小由物镜的分辨力来决定的,而物镜的分辨力又是由它的数值孔径和照明光线的波长决定的.
当用普通的中央照明法（使光线均匀地透过标本的明视照明法）时,显微镜的分辨距离为d=0.61λ/NA
式中d——物镜的分辨距离,单位 nm.　　λ——照明光线波长,单位 nm.　　NA ——物镜的数值孔径 　　例如油浸物镜的数值孔径为1.25,可见光波长范围为400—700nm ,取其平均波长550 nm,则d=270 nm,约等于照明光线波长一半.一般地,用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm.