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想知道在做PCR电泳时加loading buffer 的作用是什么?多点少点有没有影响 ,我的体系是20ul,我加2ul,6X的loading buffer 混合后 取7ul上样可以吗
人气:389 ℃ 时间:2020-04-07 12:13:59
解答
博凌科为-为你loading buffer的作用不仅仅是有染色,loading buffer的成分往往还有甘油或者蔗糖这是最关键的一点是要将你的样的密度加大,只有加大密度才能在你点样的时候,使得你的样品比TAE的密度大,从而沉的点样孔里边.所以你的问题就可以解释了,如果是6X的,那么应该是5ul的样+1ul的loading buffer,如果你加少了,那么很可能你的样品就不能很好的沉到点样孔中.这样很明显,可能跑到胶里边的样和你点进去的样的量是不同的,很有可能有一部分样漂出了点样孔
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