1 先根据部分序列设计一对引物验证一下序列是否正确（很确信就免）,需要的话克隆,有文库的话杂一下文库；2 根据已知序列设计三条巢式引物,进行5’RACE,拿到5’序列；3 同时设计巢氏引物,进行3’RACE拿到3’序列；4 ...