退火指的是是在高温下分开的DNA的两条单链,在减低温度后重新结合成为双链的过程.
退火温度与时间,取决于引物的长度、碱基组成及其浓度,还有靶基序列的长度.对于20个核苷酸,G+C含量约50%的引物,55℃为选择最适退火温度的起点较为理想.引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度：
Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T)
复性温度=Tm值-(5～10℃)
因为退火是A-T、C-G配对、形成氢键的过程,因此温度的高低会影响配对的效率.
C-G的键能高,因此存在较多的C-G的话,要在较高温度下就能使得两个单链结合为双链,也就是退火.
PS：个人认为答案应该是C.A是错误的.引物越短退火温度越低.
B一般来说是正确的,但还是受到CG含量的影响.
综上,我觉得是题目和所给的答案对不上.