1、有多个限制酶切点,而且每种酶的切点最好只有一个,可适于多种限制酶切割的DNA插入 　2、含有复制起始位点,能够独立复制；通过复制进行基因扩增,否则可能会使重组DNA丢失 　3、有一定的标记基因,便于进行筛选.
4、载体DNA分子大小应合适,以便操作.
利用一个已知载体的框架,把酶切位点,启动子,终止子位点,标记基因片段分别插入,就可以构建一个简单的载体了.