有两个方面需要注意：
1.底物 如楼上说的,必须要保证要足够的底物,使酶能完全发挥其催化功能.
2.时间的控制 根据酶促反应曲线可以看出,最开始曲线斜率比较大,然后趋于平缓（这种原因可能是生成的产物促进逆反应或是酶失活）,由此,如果测定的时间选择不当的话,测的速度也不是初速度,所以在测定的时间必须掌握在曲线斜率比较大的那段时间内.
当然,除这些之外,需给酶提供最适温度、最适PH,保证没有抑制剂存在.