质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR嗯，载体上没有通用引物，我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢，本来还担心菌液太高呢……呵呵，谢谢，那我提质粒做PCR试试。