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求教用ELISA方法大鼠脑组织提取步骤?
人气:159 ℃ 时间:2020-06-08 11:01:48
解答
样本暂时不测时负80冷冻保存,一般可以放置6个月左右,负20可放3个月,(若被检物质见光易分解则需避光保存)
制备好的匀浆液需当天进行测定(提取液不是被检物质的最适环境)
1 准确称取组织重量按重量(g):体积(ml)=1:N的比例加N倍体积的生理盐水(或PBS)(推荐N=9),冰水浴匀浆(机械式,手动等,超声不太推荐),制备成一定浓度的匀浆液,离心(根据被检物质的具休要求,推荐3000转/分左右),取上清待测
2 由于匀浆(提取)过程中会产生的一定的系统误差,需对其进行较正可根据测其上清液中蛋白浓度进行较正
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