首先试剂准备好,包括合适长度的引物,cDNA,荧光底物等等,不知道你现在准备到哪一步了.
然后要了解机器的运行软件.参数的设置,特别是退火温度等.
要做的时候,尽量在冰盒上操作,时间要快,荧光底物要避光,加样准确.
如果你没做过,建议找个做过的指导一下.