这个没有什么规律.使用哪个酶,完全取决于你载体上的酶切位点的分布,以及以后的克隆的需要.就是做几个排列组合.还有是否相容等.相容的酶可以再一个管子里面,使用相同的缓冲液,而不相容的酶只能一次用一个.