可以-20度暂时保存,但别超过12小时.退火温度是由你的引物定的,引物设计时应该有,没有的话引物合成报告上也有,在没有的话,网上有很多退火温度计算器,退火时间是一定的,不用自己调整,30s可以.延伸时间要看你的酶和所扩基因的长度.一般的酶都是1000-2000bp一分钟,也就是说你扩1000bp长度的基因,延伸时间1分钟即可.