第一个一般在94－95度左右,叫做变性,就是通过加热打开双链.
第二个温度点叫做退火,根据引物的TM算出,一般比TM低5度,有利于引物的结合.
第三个温度叫做延伸,一般采用72度.是引物结合后DNA聚合酶按照模板合成新的链.一分钟一千个碱基对.
如此循环.
现在很多PCR都采用2部法,由于采用了不同的DNA聚合酶（最佳温度60度）.这样退火和延伸采用一个温度.