A、成熟的植物细胞都可以发生质壁分离，A错误；
B、洋葱的液泡中有紫色的色素分子，所以质壁分离时容易观察到实验现象，B正确；
C、洋葱的细胞壁没有颜色，是透明的，C错误；
D、洋葱的原生质层是由细胞膜、液泡膜和两层膜之间的细胞壁组成的，而紫色位于液泡中，D错误．
故选：B．